Coombs试验

项目名称 抗人球蛋白试验 　　此项化验分直接试验和间接试验，主要用于自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的筛选和分型。 　别       名 Coombs’试验(库姆试验) 　　
英文缩写 Coombs
试验原理  抗球蛋白试验是抗球蛋白参与的一种间接血凝试验，1945年由Coombs建立。用于检测抗红细胞不完全抗体。 　　不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，是一类单价抗体，体积短小，因此虽能与相应抗原牢固结合，但在一般条件下不出现可见反应。 　　抗人球蛋白试验利用抗球蛋白抗体作为第二抗体起到桥梁的作用，连接与红细胞表面抗原结合的特异性抗体，是红细胞凝集，故又称桥梁凝集反应。
方      法　（1）直接coombs试验 用于检测已粘附在红细胞表面的不完全抗体。即将受检红细胞充分洗涤后，将抗球蛋白试剂加入已结合有抗体的受检红细胞悬液中，即可见细胞凝集。可用玻片法做定性试验，也可用试管法或微量法做半定量测定。用于检测新生儿溶血症、自身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等。 　　（2）间接coombs试验用于检测游离在血清中的不完全抗体。即将待测血清标本加入具有特异抗原的红细胞悬液中，如果抗原抗体相应则发生结合，再加入抗球蛋白抗体，则出现红细胞凝集。本法多用于检测母体Rh（D）抗体以及因红细胞不相容的输血而产生的血型抗体。此外也可用专一特异性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗补体血清等，分析与红细胞表面结合的不完全抗体的Ig亚类。 　　
参 考 值   直接和间接Coombs’试验均为阴性
临床意义　　
1、阳性见于AIHA，直接Coombs’试验较间接试验对AIHA更有诊断价值。用特异性单价抗血清可将AIHA分为三型：IgG／C3阳性，占67％；单独IgG性，占20％；单独C3性，占13％； 　　
2、药物免疫性溶血性贫血及同种免疫性溶血性贫血也可阳性。 　　
3、Coombs’试验阴性有时并不能排除AIHA。 　　
要    求   用肝素或EDTA抗凝血做直接Coombs’试验，血清做间接Coombs’试验。 　　
注意事项   受检血标本必须新鲜；洗涤后的红细胞和器材都不能残留有血浆蛋白，以免出现假阴性。

  1945年，英国免疫学家Coombs等人发明了能检测红细胞表面抗体的一种新试验，故称之，亦即抗人球蛋白试验。这是诊断免疫溶血性贫血的主要方法。 最早和现在常用的抗人球蛋白试剂是广谱抗血清，即抗IgG+抗补体。国外研究发现，如采用特异的抗IgG、IgM或抗补体的试剂，红细胞表面的抗体是IgG和补体约占40%，单纯IgG占35%，单纯补体占10%，极少数病例是IgA或IgM。补体几乎都是C 3 b，即未激活的C 3 。 Coombs直接试验：将洗涤过的红细胞2%混悬液加入Coombs试剂，混和后离心一分钟促进凝集。如果肉眼或显微镜下能见到红细胞凝集，即为阳性，说明红细胞表面有不完全抗体或补体。阳性结果可见于自体免疫溶血性贫血、输血反应、某些药物或疾病引起的免疫溶血性贫血。 Coombs间接试验：先将受试的血清加入等量5%适当的正常红细胞(Rh阳性的O型红细胞)，在37℃温育30～60分钟，以促使血清中的半抗体结合于红细胞上(致敏)，将红细胞充分洗涤，以后同直接试验。如果红细胞发生凝集而正常对照(未经与受检血清温育的正常红细胞)不凝集，即为阳性，表明受试的血清中存在不完全抗体。