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柴芦疏肝解毒胶囊

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  柴芦疏肝解毒胶囊是无极县红十字血康医院临床治疗肝胆湿热证的中药复方制剂,由柴胡、菌陈、栀子、芦荟 、西洋参、白术等组成,具疏肝健脾,清热解毒之功,能清利肝胆湿热,适用于肝郁脾虚,热毒内结所致的胸胁胀痛,脘痞腹胀,倦怠乏力,口苦咽干,食少纳呆等症及肝功能损害、急慢性肝炎,可改善肝功能低下患者临床症状,有明显的降酶作用。试验表明:该制剂能降低CC1肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,有一定的保肝作用,能降低转氨酶(SGPT)。为进一步探讨其更广泛的作用机制,笔者采用小鼠酒精实验性肝损伤模型,观察该药对肝损伤的保护作用,为扩大临床应用提供广泛的实验基础。

目录

  1 材料与方法编辑本段回目录

  1.1药物 柴芦疏肝解毒胶囊,无极县红十字血康医院提供,批号20081001,每克含原生药3.5g,临床成人日服剂量3.6g(0.4g/粒,一次3粒,一日3次),为0.06g/(kg·d);护肝片,薄膜衣片每片重0.36g,黑龙江葵花药业股份有限公司生产,批准文号为:国药准字Z20003336,批号200702051,成人剂量一次4片,一日3次。临床成人日服剂量为0.07g/(kg·d)。

  1.2 动物 昆明种小鼠(清洁级),雄性,体质量18-20g,由河北省实验动物中心提供;动物合格证号为908102;动物饲料为消毒饲料、垫料为消毒垫料,亦由该中心提供;实验动物使用许可证SYXK(冀)2006-0047,动物室环境:室温:20~23℃,相对湿度:45%~60%。

  1.3 仪器与试剂 40B离心机,上海安亭科学仪器厂产品,美国ACE全自动生化分析仪;722分光光度计为上海第三分析仪器厂生产;生物显微镜为日本奥林巴斯产口;56度二锅头白酒,北京红星股份有限公司生产,蒸馏水配成50%白酒备用。血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天科氨酸转氨酶(AST)试剂盒、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒,南京建成生物工程研究所产品。

  1.4 实验方法 采用实验性肝损伤模型,对小鼠进行适应性饲养1周后,按体质量随机分为6组,每组10只,分别为正常对照组、模型对照组、柴芦疏肝解毒胶囊低剂量组、中剂量组及高剂量组,(低、中、高剂量组给药剂量分别为0.3g/(kg·d)、0.6g/(kg·d)和1.2g/(kg·d),分别相当于临床剂量的5倍,10倍和20倍及阳性对照组(护肝片0.7g/kg,相当于成人临床用量的10倍)。参照文献方法[2]进行实验。除正常对照组外,其余各组均给予50%白酒灌胃,连续8周。第1~4周灌胃体积为10ml/(kg·d);第5~8周灌胃体积增大至20ml/(kg·d)。在模型制备的第5周时,4个给药组分别在灌酒后6h灌胃给药,正常对照组和模型对照组小鼠禁食不禁水12h,用戊巴比妥纳腹腔注射麻醉后,打开腹腔,经下腔静脉取血,3000r/min离心15min,分离血清,按试剂盒说明测AST、ALT。取肝组织用冷生理盐水制成10%肝匀浆,检测肝组织MDA和GSH的含量;剖取肝脏,在距边缘0.5cm处取样,10%甲醛溶液固定,石蜡包埋切片,HE染色,光镜观察。

  1.5 统计分析 采用SPSS12.0进行统计分析,计量资料均数用(x(-±s)表示,采用t检验比较各组间差异情况。

  2 结果编辑本段回目录

  2.1 对实验性肝损伤小鼠血清ALT、AST含量的影响(表1)。

  从表1可见:模型对照组小鼠血清ALT和AST水平明显升高,与正常对照组比较差异非常显著(P<0.01),说明肝损伤模型成立。与模型组比较,柴芦疏肝解毒胶囊中、高剂量组血清ALT和AST水平均明显降低趋势,无显著性差异(P<0.05)。阳性对照药护肝片与模型组比较,血清ALT和AST水平均明显降低,有显著性差异(P<0.05)。提示柴芦疏肝解毒胶囊对小鼠酒精实验性肝损伤模型血清ALT和AST水平升高有明显的拮抗作用,呈一定的量效关系,与阳性对照药护肝片的作用一致。

  2.2对实验性肝损伤小鼠肝组织GSH和MDA含量的影响

  由表1可见:肝损模型对照组小鼠肝组织GSH含量明显低于正常对照组,MDA含量显著高于正常对照组,两者与正常对照组比较差异均非常显著(P<0.01),表明肝损伤模型成立。柴芦疏肝解毒胶囊各剂量组小鼠的肝组织GSH含量均高于模型对照组,高剂量组与模型对照组的有显著性(P<0.05),表明该受试样品具有提高酒精性肝损伤的小鼠肝组织中GSH含量的作用;柴芦疏肝解毒胶囊各剂量组小鼠的肝组织MDA含量均低于肝损伤模型对照组,高剂量组与模型对照组的差异具有显著性(P<0.05),表明该制剂对酒精实验性损伤小鼠肝组织中的过氧化脂质含量具有降低作用。这与阳性对照药护肝片对小鼠肝组织GSH含量和MDA含量的作用基本一致。

  2.3对肝组织肝组织病理学的影响

  光镜下观察,正常对照组小鼠肝细胞结构清晰,细胞索整齐,细胞核圆而大,胞质丰富。模型对照组小鼠肝细胞体积明显增大,包膜紧张,细胞脂肪变性,肝小叶界限不清,细胞索紊乱,细胞核被挤向细胞周边,部分细胞核体积缩小,可见点、片状坏死,伴有大量炎性细胞浸润。经柴芦疏肝解毒胶囊治疗的各剂量组小鼠肝脏颜色红润,被膜光滑,质地接近正常肝组织。与模型对照组对比,给药各剂量组小鼠肝细胞的脂肪变性、炎性反应都有所减轻,肝细胞核周围脂肪空泡明显减少,肝小叶内有少量炎性细胞浸润,未见点状坏死,肝小叶结构清晰,细胞索排列较整齐,高剂量组接受正常对照组水平。提示该药具有减轻实验性肝损伤的作用,且呈一定的量效关系。

  3 讨论编辑本段回目录

  3.1 酒精性肝损伤是指长期大量饮酒或含有乙醇的饮料所造成的肝脏疾患,包括轻症酒精性肝病、酒精性脂肪肝、酒精性肝炎,酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化等。其发病机制在肝组织损伤或坏死时,酶从细胞内逸出,进入血液。在肝细胞损伤、细胞膜通透性增加时,细胞内转氨酶也可由于这种浓度梯差而渗漏入血中,可使血中酶活性增高,因此转氨酶是肝细胞损害的敏感标志,也是乙醇所致肝损伤最敏感的指标。酒精性肝炎AST多增高且增高明显,导致各种肝损伤,血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)等指标升高。

  MDA是脂质过氧化的终产物,它既能反映人体内氧化反应,也能作为损害因子对人体进行损伤。MDA具有强交联性质,可使胞浆、膜蛋白及某些酶交联成二聚体或更大的聚合物,使其本身丧失活性、结构改变,乃至整个细胞功能丧失。GSH是一种低分子清除剂,是GSH-PX的底物,对脂自由基及脂质过氧化自由基等具有较强的清除作用。肌体氧化反应亢进时,GSH不断消耗,可导致GSH不足以清除自由基,形成自由基的损伤。自由基引起肝细胞微粒体膜磷脂中多价不饱和脂肪酸发生脂质过氧,破坏细胞膜及内膜结构,使肝脏受损。此外,自由基极易与膜蛋白、酶蛋白结合,降低细胞中抗氧物和蛋白含量,使细胞器中酶性及膜功能降低,影响物质在肝脏中代谢。

  3.2本实验表明,乙醇导致酒精性肝损伤小鼠血清ALT、AST升高,肝组织过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量升高,还原型谷胱甘肽(GSH)含量降低,并对肝组织结构、肝小叶、肝细胞造成一定损害。柴芦疏肝解毒胶囊能显著降低酒精性肝损伤小鼠血清ALT、SST的含量,尤其是中、高剂量组效果明显,与模型组比较,血清ALT、AST的含量降低差异非常显著(P<0.01或P<0.05),呈一定的量效关系;对酒精实验性损伤的小鼠肝组织中MDA含量具有降低作用,可提高其肝组织中GSH含量,阻止GSH的耗竭,提高GSH活性,对抗过氧化反应,减轻其肝组织的脂肪变性程度,肝组织病理学观察亦显示对肝损伤改善为明显,接受于正常对照组,该作用在大剂量时更明显,提示该制剂减轻酒精实验性肝损伤的作用呈现一定的量效关系。

  实验结果显示,柴芦疏肝解毒胶囊能显著降低酒精实验性肝损伤小鼠血清ALT、AST的含量,降低肝组织中丙二醛(MDA)含量,提高肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)含量,改善受损伤的肝组织,对动物实验性肝损伤具有较好的保护作用。

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